自从达芬奇的《蒙娜丽莎》问世之后，其神秘的微笑以及背后的秘密一直困扰了人们数个世纪。直到近年来，才有人发现了蒙娜丽莎的25个秘密，这些秘密只是这幅画上用肉眼难以发现的痕迹，而最令人震惊的秘密是《蒙娜丽莎》其实是用四幅肖像画叠加而成的，不知道这是后人的过度解读，还是达芬奇故意为之。
1、蒙娜丽莎被画在白杨木画板上，且可完全透8视，可以看到画作分层范围以及前置的石膏底。
2、上方的天空经过修复，并且经历多次细微的修改。
3、画板裂口长4.3英寸，并经过二度重叠修复。
4、头部精致的双层头纱有时会被误以为是帽子，这在蒙娜丽莎的25个秘密中是很多人都知道的。
5、眼角和下巴的污渍是月亮光漆造成的意外(否定了蒙娜丽莎带病在身或胆固醇过高之说)